分离方式的选择

　　　高效液相色谱中几种分离方法都有各自的适用范围。具体选用哪一种分离方法比较合适，这取决于样品的性质，如分子量范围、溶解度、官能团类型及其数量等，有红外、紫外、核磁等数据可获得样品的有关信息，有助于选择分离方式。若组份分子量大于2000，应采用排阻色谱法：若样品溶于水，则以水溶液为流动相；若样品溶于有机溶剂，则相应的溶剂可用做流动相。若分子量小于2000，首先应确定样品是否溶于水：若样品溶于水，可以考虑用离子交换色谱法、离子色谱法或反相键合相色谱；若样品不溶于水，但溶于有机溶剂，可考虑用键合相色谱或吸附色谱；若样品溶于中等极性或强极性溶剂，则采用极性固定相。分离方式选择的一般原则可示意如下：

　　　　　　（见图F-1）

　　　分离方式确定后，可以选择固定相，要记住高效液相色谱中70%以上的分离工作是用反相键合相色谱完成的，流动相和固定相色谱之间存在着一定的配伍关系。

　　　　　　（见图F-2）

　　　根据分析课题及其要求，借鉴文献资料，结合实验条件，可制定合适的分析条件。但在高效液相色谱中，即使固定相、流动相条件与文献条件完全一致，不一定能得到相同的分离效果，必须根据自己的实验来确定最佳条件。

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