梯度液相色谱系统的选择

　　　梯度洗脱技术已经广泛地应用于复杂混合物样品的分离分析，尤其适用于中药制剂和复方制剂的色谱分析。

　　　在高效液相色谱中，梯度洗脱通常是指溶剂强度梯度洗脱。梯度洗脱就是将流动相中含有两种或两种以上极性不同的溶剂，在分离过程中以一定的程序连续的改变组成的比例关系，使其极性强度按一定强度变化，从而提高分离的效果和速度。

　　　梯度洗脱可解决多组份分离中常规洗脱法难以解决的容量因子值范围过大的问题。当多组份样品的始末两色谱峰的容量因子相差很大时，梯度洗脱是能提供适当分离度并缩短分离时间的唯一方法。

　　　梯度洗脱可分为低压梯度和高压梯度。低压梯度装置使在常压下将不同极性的溶剂按预先设定的比例在泵前混合后，再由高压泵输入色谱柱。高压梯度装置是用两台或三台高压泵分别将两种或三种不同极性的溶剂输入混合器，经充分混合后输入色谱柱。梯度洗脱装置的混合器应具有容积小、无死区、清洗快捷和混合效率高等性能，才能获得滞后时间短、重现性好的梯度洗脱色谱的分析。

　　　高压梯度洗脱装置的主要缺点是需要多台高压泵方可完成，价格昂贵。低压梯度装置的致命缺点是气泡问题难以解决。因为低压梯度的混合器实际处于负压工作状态，所以当两种不同极性的溶剂在混合器相遇时，极易产生气泡。因流动相中的气泡会严重影响色谱过程的稳定性及分离效率，甚至导致色谱分析过程的失败。所以低压梯度洗脱装置一般均需配置在线脱气机，这就增加了购置成本。如果用的是在线真空脱气机，还会因被混合的溶剂的饱和蒸汽压的不同引起流动相的实际梯度值偏离梯度的设置值，降低了梯度准确度。美国Varian公司的ProStar230低压梯度输液泵采用独特"激活式机械驱动单向入口阀"专利技术，克服了普通低压梯度泵无法解决的气泡问题。

　　　选择高压梯度还是低压梯度装置，用户可以根据自己的实际情况及被分析样品的色谱备件进行综合考虑。

　　　（下期讲述检测器的选择）。

　　相关文章